HPLC préparative appliquée à la purification de peptides Présentiel
Dernière mise à jour : 09/02/2026
Unité de recherche
Description
1er jour
Formation théorique (3h30) COURS
- Principes généraux : comprendre les phénomènes mis en jeux en chromatographie
- Silices greffées : fabrication, état du marché, apprendre à choisir le bon support
- Grandeurs fondamentales : définitions, apprendre à les calculer
- Facteurs influençant les purifications : temp ; nature des éluants (compo et pH), géométrie colonne, volume d'injection, charge, type de greffage
Méthodologie (3h30) COURS
- Préparation de l'échantillon
- Détermination des paramètres chromatographiques
- Exemple d'étude méthodologique : pH-temps d'élution-estimation de la quantité à purifier-écriture de méthode
- Les bonnes pratiques et erreurs à éviter
- Exercices d'application à effectuer en autonomie
2ème jour
Travaux pratiques/Travaux dirigés (3h30)
- Détermination expérimentale du volume mort et du volume délai (3 injections)
- (1 injection sans colonne de 200µl de DMSO à 100% de voie A - 1 injection avec colonne de 200µl de DMSO à 100% de voie A - 1 élution de 10 minutes voie A (ACN) et voie B (ACN+5% Acétone))
- Déterminer par le calcul tous les paramètres chromatographiques (Débit optimal - volume retard - temps retard - quantité de silice - volume d'injection - temps réel d'élution - % réel d'élution)
- Détermination graphique du % d'élution observé estimé du composé ciblé
- Déterminer le gradient de purification
- Ecriture de la méthode sur l'appareil
- Estimer le temps de rétention en mode préparatif.
Travaux pratiques / Travaux dirigés (3h30)
- Mise en œuvre de la purification et description des fonctionnalités
- Corrections des exercices d'application
- Test d'évaluation
Objectifs de la formation
- Comprendre les phénomènes chromatographiques mis en jeu pendant l'analyse pour optimiser le protocole de purification
- Transposer le changement d'échelle (de l'analytique vers la préparative)
- Mettre en œuvre une purification par HPLC préparative en phase inverse
Public visé
Ingénieurs, techniciens, utilisateurs de la technique de chromatographie en phase liquide
Prérequis
Niveau Bac + 2 minimum en chimie ou en biologie. Connaissances de base en HPLC
Modalités pédagogiques
Alternance de cours (7 h) et de TP/TD (7 h).
Moyens et supports pédagogiques
Un support papier et un fichier au format PDF seront mis à disposition du participant.
Modalités d'évaluation et de suivi
Un suivi individualisé par des évaluations formatives est assuré. Une attestation de fin de formation est délivrée à la fin du parcours.
Formateurs
BL
BRUNEL Luc
Responsable scientifique
VP
VERDIE Pascal
Responsable scientifique
Informations sur l'admission
L'admission à cette formation ne fait l'objet d'aucun examen, test ou sélection préalable ; l'inscription est validée après réception du dossier complet et confirmation par l'organisme de formation.
Modalités tarifaires spécifiques
Nos formations sont exonérées de TVA. Elles bénéficient de remises volumes : - 5% pour 3-4 inscrits, - 10% pour 5-6 inscrits, et - 20% à partir de 7 personnes. Une réduction de 20% est appliquée pour les agents salariés du CNRS.
Informations sur l'accessibilité
Notre organisme s'engage à garantir l'accessibilité de ses formations à distance et en présentiel aux personnes en situation de handicap. Un référent handicap est mobilisable afin d'analyser les besoins spécifiques et de mettre en place, lorsque cela est possible, les adaptations pédagogiques, techniques ou organisationnelles nécessaires.