HPLC en pratique - initiation Présentiel

AXE 9 - Chimie analytique

Environnement scientifique et technique de la formation

Institut des sciences analytiques
http://isa-lyon.fr

RESPONSABLES
Vincent DUGAS
Maître de conférences
UMR 5280
Claire DEMESMAY
Professeure
UMR 5280

Chromatographie et électrophorèse

HPLC en pratique - initiation

PROGRAMME

1. 1er jour
   - Description d'un système de chromatographie en phase liquide, présentation des principes de la technique
   - Les grandeurs fondamentales : caractéristiques géométriques, paramètres opératoires, temps et facteur de rétention, perte de charge
   - Comment démarrer avec un système chromatographique et s'assurer de son bon état de fonctionnement ?
2. 2ème jour
   - La nature des phases stationnaire et mobile en chromatographie à polarité de phase inversée et en mode HILIC et leur effet sur la rétention
   - La dispersion en chromatographie ; les grandeurs de qualité pour caractériser une bonne séparation : résolution, temps d'analyse
   - Influence de la composition de la phase mobile sur la rétention, la sélectivité, la résolution et le temps d'analyse en RPLC
3. 3ème jour
   - Synthèse sur les facteurs permettant d'optimiser la qualité de la séparation : qui joue sur quoi ?
   - Exploitation d'un outil de simulation de chromatographie en phase liquide pour valider les paramètres d'influence ; les bases de l'analyse quantitative ; analyse quantitative
4. 4ème jour
   - La chromatographie des substances ionisables : recul et contrôle d'ionisation, échange et appariement d'ions
   - Facteurs d'influence en gradient d'élution : pente et composition initiale, nature du solvant organique, temps d'équilibrage ; rétention de composés acide et/ou basique en fonction du pH
5. 5ème jour (matinée)
   - Du démarrage du système à la réalisation de l'analyse au travers d'une nouvelle problématique

À L'ISSUE DE LA FORMATION
Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation

DATE DU STAGE
Réf. 25 169 : du lundi 02/06/25 à 09:00 au vendredi 06/06/25 à 12:30

Ce stage peut se poursuivre par la formation "HPLC en pratique : perfectionnement"

EQUIPEMENT
Instruments LC-DAD des sociétés Agilent, Shimadzu, Thermo

• Connaître les principes de l'appareillage et les notions fondamentales de la chromatographie
• Être capable de sélectionner la colonne, le mode chromatographique et les paramètres opératoires du système en fonction de la problématique
• Savoir optimiser une analyse en mode isocratique
• Savoir réaliser une analyse quantitative
• Mettre en œuvre une analyse en mode gradient

• Alternance de cours et de travaux dirigés (14 h) et de travaux pratiques (18 h)
• TP encadrés par 1 intervenant pour 4 stagiaires maximum

Un positionnement est demandé aux stagiaires sur une dizaine d'items en début de stage. A la fin du stage, un positionnement par rapport au niveau d'entrée de chacun est redemandé, ainsi que le positionnement à l'issue du stage.

Un support papier et des fichiers Excel de traitement des données seront mis à disposition du stagiaire.

Evaluation de la formation par les stagiaires

Envoi d'une attestation de formation