Production et analyse de protéines recombinantes Présentiel
Dernière mise à jour : 29/10/2025
Description
Cours (17,5 h)
- De la cellule au gène : rappels sur l'expression d'un gène (transcription, traduction) ; notions de mutations
- Les éléments nécessaires à la surexpression d'un gène : choix du vecteur et choix de la cellule hôte
- Méthodes de fusion de gènes et d'étiquetage de protéines : étiquetage d'un gène dans un vecteur par la méthode des enzymes de restriction, par la méthode "In-Fusion", par recombinaison homologue
- Méthodes de mise en évidence de l'expression génique ou de la production de protéines recombinantes, détections par Western Blot (principe de l'immuno-détection par chimioluminescence, par la phosphatase alcaline (PhoA) et par fluorescence)
Travaux pratiques et dirigés (17,5 h)
- Travaux dirigés sur l'expression génique et sur le clonage en respectant le cadre ouvert de lecture : utilisation du logiciel "Clone Manager V 9"
- Mise en culture des cellules bactériennes en conditions stériles et induction de l'expression d'un gène par l'IPTG
- Extraction des protéines totales, dosages, dépôts sur 2 gels et migration, visualisation des protéines sur 1 gel, transfert des protéines du 2ème gel sur membrane nitrocellulose, visualisation des protéines sur membrane
- Identification
Objectifs de la formation
- Acquérir les fondamentaux de la biologie moléculaire et de la biochimie des protéines pour produire, extraire et analyser les protéines recombinantes
- Maîtriser l'utilisation du logiciel Clone Manager pour réussir le clonage et la production de protéines in silico
- Choisir la méthode appropriée pour détecter les protéines recombinantes
Public visé
Ingénieurs, chercheurs et techniciens en biologie, pharmacologie, chimie et/ou biophysique
Prérequis
Connaissances de base en biologie moléculaire et en génie génétique. Avoir suivi la formation "De la biologie moléculaire au génie génétique : théorie et pratique" ou niveau équivalent
Modalités pédagogiques
17 h 30 cours et 17 h 30 TP
Moyens et supports pédagogiques
Matériel standard d'un laboratoire de biologie moléculaire et de microbiologie
Il est demandé aux participants de venir avec leur propre ordinateur PC (et non pas Mac) portable avec les droits administrateurs afin de pouvoir installer en début de stage les logiciels nécessaires à la formation.
Il est demandé aux participants de venir avec leur propre ordinateur PC (et non pas Mac) portable avec les droits administrateurs afin de pouvoir installer en début de stage les logiciels nécessaires à la formation.
Modalités d'évaluation et de suivi
Un suivi individualisé par des évaluations formatives est assuré. Une attestation de fin de formation est délivrée à la fin du parcours.
Formateurs
BK
BELHABICH-BAUMAS Kamila
Responsable scientifique
Modalités tarifaires spécifiques
Nos formations sont exonérées de TVA. Elles bénéficient de remises volumes : - 5% pour 3-4 inscrits, - 10% pour 5-6 inscrits, et - 20% à partir de 7 personnes. Une réduction de 20% est appliquée pour les agents salariés du CNRS.
Informations sur l'accessibilité
Notre laboratoire est entièrement accessible aux personnes à mobilité réduite (PMR). Un accès adapté, des espaces de circulation et des sanitaires spécifiques sont à votre disposition pour garantir votre confort et votre autonomie. Pour toute information complémentaire, veuillez nous contacter.