HiPSC et hESC : culture, banque cellulaire, validation et utilisation des cellules souches pluripotentes humaines (hPSC) Présentiel

Cours interactifs (9 h)

• Compréhension des cellules souches pluripotentes humaines (hPSC) : historique, notion de pluripotence, dérivation, reprogrammation, différenciation, édition de génome et applications thérapeutique
• Validation des hPSC : intégrité génomique, potentiel de différenciation, transgènes
• Gestion d'une banque de cellules : amplification et traçabilité
• Réglementation et Ethique liées à l'utilisation des hPSC
• Consommables de culture associés à la culture des hPSC
• Modèle cellulaire intégré : présentation de partenaires extérieurs sur le développement de modèles organoïdes intestinaux et cérébraux

Manipulations en laboratoire (13 h)

• Préparation des matrices et milieux spécifiques
• Observation des hPSC à différents stades de culture
• Entretien des lignées : passage et nettoyage
• Congélation et décongélation
• Préparation des cellules à une mise en différenciation : passage en cellules uniques ou génération de corps embryonnaires

• Appréhender les conditions optimales de culture et les tenants et aboutissants d'un projet utilisant les hPSC
• Maîtriser les méthodes de passage et d'entretien des hPSC
• Maîtriser la gestion de banque cellulaires : « Master Cell Bank » et « Working Cell Bank »
• Comprendre les contrôles qualités et leur importance respective pour les hPSC
• Lancer une mise en différenciation des hPSC en 2D ou en organoïdes

Maîtrise les bonnes pratiques de laboratoire

Être autonome en culture cellulaire en L2

EQUIPEMENT : Laboratoire de confinement de niveau 2 (L2), PSMs, microscopes à contraste de phase inversé, incubateurs, centrifugeuse, réfrigérateurs-congélateurs, congélateur -30°C et -80°C, Cryo-conservateur -150°C

Un support papier et un fichier au format PDF seront mis à disposition du participant.