PCR quantitative en temps réel Présentiel
Dernière mise à jour : 07/10/2025
Description
AXE 12 - Biologie moléculaire et biochimie
Environnement scientifique et technique de la formation
Institut de chimie des substances naturelles
https://icsn.cnrs.fr/
RESPONSABLES
Eric JACQUET
Chargé de recherche
UPR 2301
Naima NHIRI
Ingénieure de recherche
UPR 2301
LIEU
GIF-SUR-YVETTE (91)
PCR quantitative en temps réel
PROGRAMME
Cours et travaux dirigés
Lieux accessibles aux PMR
COÛT PÉDAGOGIQUE
2040 Euros
- Principes de la PCR et de la PCR quantitative en temps réel, choix des amorces, choix de la technique et des fluorophores utilisés. Notion de Ct, calcul de l'efficacité, résolution des problèmes de spécificité et de sensibilité
- Principes de la qPCR absolue ou relative
- Sélection des gènes de référence et méthode de normalisation, utilisation des logiciels geNorm et NormFinder
- Analyses des données de qPCR, courbes de fluorescence, limite de Ct, réplicats techniques, calcul des variations d'expression, méthode ∆ ∆ Ct
- qPCR en microplaque, carte microfluidique et nanovolumes
- Normes MIQE
Travaux pratiques
- Broyage, extraction, purification des ARN
- Dosage et contrôle qualité des ARN
- Contrôle de la non-contamination des ARN par qPCR
- Etape de transcription inverse
- Contrôle qualité des cDNA par qPCR
- Utilisation d'amorces pour qPCR sybrGreen et/ou TaqMan
- Utilisation de dilutions en série pour la réalisation de gamme de qPCR
- qPCR en microplaque et carte microfluidique
- Calculs et résultats en quantification absolue et en quantification relative, calcul des efficacités, stabilité des gènes de référence utilisés, calcul des variations d'expression
À L'ISSUE DE LA FORMATION
Evaluation de la formation par les stagiaires
Envoi d'une attestation de formation
DATE DU STAGE
EQUIPEMENTS
Broyeur Precellys, Qiacube Qiagen, Nanodrop, Qubit, Bioanalyzer Agilent, TapeStation Agilent, PCR Master cycler Eppendorf, robot EpMotion 5075, qPCR StepOnePLus, qPCR QuantStudio.
Il est conseillé de venir avec son propre ordinateur portable et de se munir d'une blouse de laboratoire.
Réf. 25 393 : du lundi 03/11/25 à 09:30 au vendredi 07/11/25 à 16:00 entreprises - Tél. : +33 (0)1 69 82 44 55 - Email : cfe.contact@cnrs.fr - http://cnrsformation.cnrs.fr
INTERVENANTS
E. JACQUET (chargé de recherche) et N. NHIRI (ingénieure de recherche)
Objectifs de la formation
- Acquérir les connaissances théoriques permettant la réalisation d'un projet de PCR quantitative
- Maîtriser les différentes étapes pratiques nécessaires au projet de qPCR, de l'extraction des acides nucléiques au traitement des données
- Identifier les points critiques pour la bonne réalisation d'un projet de qPCR
Public visé
Afin d'adapter le contenu du stage aux attentes des stagiaires, un questionnaire téléchargeable devra être complété et renvoyé au moment de l'inscription.
Prérequis
Modalités pédagogiques
TD et TP en sous-groupe de 2 ou 3 stagiaires maximum avec un intervenant par sous-groupe.
Des supports papier ainsi que des fichiers aux format PDF et Excel seront mis à disposition des stagiaires.
Tout au long de la formation, des cas pratiques ou exercices corrigés permettront à l'apprenant d'évaluer l'acquisition des compétences.
Moyens et supports pédagogiques
Modalités d'évaluation et de suivi
Envoi d'une attestation de formation
Formateurs
JACQUET Eric
Responsable scientifique
NHIRI Naima
Responsable scientifique