Histologie : méthodes de coupes, colorations, immunohistochimie. Comment choisir, mettre au point et optimiser un protocole adapté Présentiel

La formation portera sur la préparation d'échantillons pour la microscopie : fixation, coupe de tissus, mise sur lame, coloration, immunohistochimie. Nous verrons aussi comment vérifier la qualité d'une préparation. L'accent sera mis sur les choix techniques en fonction de la question biologique, et de la mise au point de nouveaux marquages, avec une mise en pratique.

Cours et tables rondes (60%) :

• Préparation des échantillons : présentation des différents types de fixation de tissu et de leurs spécificités, détails de la préparation des tissus pour une inclusion en paraffine ou congélation, présentation des paramètres de coupe
• Présentation des colorations les plus courantes, et des étapes clefs de ces protocoles
• Immunohistochimie : présentation du principe et des différentes possibilités de révélation (DAB, fluorescence, amplification du signal), mise au point d'un nouveau marquage en fonction de l'objectif recherché (localisation, quantification, etc), principaux artefacts/problèmes que l'on peut rencontrer
• Présentation des technologies émergentes : RNAscope, multiplexing

Travaux pratiques (40%) :

• Préparation d'échantillons (inclusion/coupe/coloration/IHC)
• Acquisition d'images pour validation de la préparation et introduction à l'analyse d'images (ImageJ)

• Acquérir les bases théoriques et pratiques de la préparation d'échantillons en histologie (coupe, coloration, immunohistochimie)
• Choisir la technique adaptée en fonction de la question biologique posée
• Mettre au point et optimiser un protocole de préparation d'échantillons pour une meilleure reproductibilité des résultats
• Reconnaître les artefacts de préparation les plus courants